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液相保護柱在高效液相色譜(HPLC)分析中扮演著重要角色,特別是在處理色素、防腐劑等復(fù)雜樣品時,其預(yù)處理效果直接關(guān)系到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和儀器的使用壽命。以下是對液相保護柱在色素、防腐劑高效預(yù)處理方面的詳細(xì)探討:一、液相保護柱的作用1.延長色譜柱壽命:保護柱能夠阻擋樣品中的顆粒和雜...
c18色譜柱的柱效能是評價色譜性能的一項重要指標(biāo),混合物能否在色譜柱中得到分離,除取決于選擇合適的固定相外,還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關(guān)。高效液相色譜柱的正確使用包含:加裝保護柱,過濾流動相和樣品,凈化樣品,避免過高的柱壓,注意溫度和酸堿度,正確及時的沖洗等。1、加裝保護柱保護柱的作用是過濾掉來自流動相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時也可以有效除去流動相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動相吸入口、進樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾...
什么是固定相?簡而言之就是在色譜分離中固定不動、對樣品產(chǎn)生保留的一相。固定相的選擇對樣品的分離起著重要作用,有時甚至是決定性的作用。不同類型的色譜采用不同的固定相,如氣-固色譜的固定相為各種具有吸附活性的固體吸附劑;氣-液色譜的固定相是載體表面涂漬的固定液,液相色譜中的固定相為各種鍵合型的硅膠小球,離子交換色譜中的固定相為各種離子交換劑,排阻色譜中的固定相為各種不同類型的凝膠等等。以下,恒譜生將簡單帶大家了解一下固定相的不同類型以及它們有什么特點。正相色譜正相色譜柱填料極性強...
色譜保護柱在液相分析中是至關(guān)重要的,保護柱能夠過濾色譜系統(tǒng)內(nèi)部污染和樣品污染,從而達到保護色譜柱的效果。特別是做中藥、天然產(chǎn)物、合成物等基質(zhì)復(fù)雜的樣品分析檢測時,建議使用恒譜生色譜保護柱。因為基質(zhì)復(fù)雜,樣品溶解度差異不同,樣品析出污染色譜柱的幾率大大增大,梯度洗脫時影響更大,使用恒譜生液相保護柱能夠有效過濾污染物,保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。生物樣品分析時也建議使用保護柱預(yù)柱,它可先于色譜分析柱承受樣品的不可逆吸附導(dǎo)致的污染,從而延長分析柱壽命。既然保護柱這么好,我們該如何挑選合適...
關(guān)于液相色譜柱的使用注意事項,一般有以下幾點:1.加裝保護柱保護柱的作用是過濾掉來自流動相和樣品的化學(xué)“拉圾”同時也可以有效除去流動相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動相吸入口、進樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污染,因此,加裝保護柱是必要的,特別是在分析中藥、中成藥等復(fù)雜混合物和生物樣品時更是保護分析柱不可少的措施。保護柱填料應(yīng)與分析柱一致,粒徑可較分析柱大。保護柱屬消耗品,經(jīng)過一定次數(shù)的樣品分析...
檢測液相色譜柱安裝和系統(tǒng)檢漏工作完成后,可以對液相色譜柱進行老化了。1.老化的方法:老化的方法通常是將液相色譜柱升至一恒定溫度,通常為其溫度上限。特殊情況下,可加熱至使用溫度之上約10~20℃左右,但是一定不能超過液相色譜柱的溫度上限,那樣極易損壞液相色譜柱。當(dāng)?shù)竭_老化溫度后,記錄并觀察基線。初始階段基線應(yīng)持續(xù)上升,在到達老化溫度后5~10分鐘開始下降,并且會持續(xù)30~90分鐘。當(dāng)?shù)竭_一個固定的值后會穩(wěn)定下來。如果在2~3小時后基線仍無法穩(wěn)定或在15~20分鐘后仍無明顯的下降...
經(jīng)常使用色譜柱進行色譜分析的同學(xué),常常會有困惑,為什么柱子使用一段時間后柱效下降?柱效下降主要是因為色譜柱在系統(tǒng)里受到來自樣品或者系統(tǒng)內(nèi)部的污染,這些化學(xué)污染物讓柱頭塌陷或者柱篩板堵塞,柱效不僅下降還會縮短柱子的使用壽命。由此可見,避免色譜柱被污染,是維護柱效和延長色譜柱使用壽命的有效手段。污染物從何而來?比如樣品帶來的污染主要是樣品未*溶解或流動相和樣品之間發(fā)生反應(yīng)析出沉淀物。如果是經(jīng)常對中藥、合成物、生物制品進行分析的同學(xué)就會深有感觸,這些樣品基質(zhì)非常復(fù)雜,導(dǎo)致分析柱受污...